La purification par chromatographie liquide est toujours un défi et il y a souvent un compromis à trouver entre la pureté obtenue, le chargement de l’échantillon, et le débit souhaité.
Pour améliorer l’efficacité dans l’obtention de composés purs, les chimistes doivent trouver le meilleur équilibre entre la pureté, la durée de la méthode, et les considérations environnementales. Cet équilibre délicat est souvent nécessaire aussi bien pour des produits bruts que pour une purification finale.
Le Concept UPFP, Ultra Performance Flash Purification, permet de travailler avec un débit plus élevé, donc de réduire le temps et le coût par échantillon, le tout avec une efficacité plus grande.
Ce qui différencie ce concept UPFP de la chromatographie Flash traditionnelle, est la combinaison d’une technologie de machine performante, et de la maîtrise de petites particules de silice sphérique dans nos colonnes de puriFlash®.
Cette combinaison offre des avantages significatifs par rapport à la silice traditionnelle de qualité flash.
La colonne puriFlash : L’outil de séparation
La sélection du support doit tenir compte du volume de l’échantillon, de la nature de l’analyte et de sa concentration, et des propriétés intrinsèques de la matière de l’absorbant.Silice et silice greffée sont des supports rigides qui ne rétrécissent ni ne gonflent avec les solvants.
La surface de la silice peut être facilement modifiée, ce qui crée un potentiel pour une grande sélectivité pour la purification d’interactions hydrophobes-hydrophiles. La stabilité au pH de la silice greffée est limitée, typiquement dans la plage de 2 à 7,5, cela dépend de la chimie. Plus de 20 silices différentes en sélectivité sont disponibles pour satisfaire à tout type de purification.
Grâce à notre silice sphérique ultra-pure, nous pouvons obtenir une plus grande reproductibilité, et ainsi réaliser des purifications d’échantillons optimisées.
Quels bénéfices pouvons-nous tirer des silices de plus fine granulométrie ?
Nous avons comparé la purification de deux colorants alimentaires sur une colonne standard et une colonne puriFlash.
1. Première purification : Avec silice irrégulière 50 µm – colonne de 12g (Réf: IR-50SI / 12g).
Deux éléments importants peuvent être observés sur les images:
- Peu d’espace entre les composés jaune et bleu, ce qui signifie une capacité de chargement faible.
- Les 2 colorants présentent une large bande, ce qui implique un grand volume de collecte.
2. Deuxième purification : Avec silice sphérique 15 µm – 12 g (Réf: PF-15SIHP / 12g) en utilisant les mêmes conditions.
On constate d’énormes différences par rapport à la purification précédente :
- Sur l’image 3, nous constatons que lorsque le jaune sort de la colonne, le bleu n’a pas commencé à descendre, ce qui signifie que nous avons la totalité de la longueur du lit disponible, et que l’on peut donc accepter plus de produits. La capacité en est considérablement améliorée.
- Sur l’image 4, la zone du composé bleu est très petite, présentant une couleur bleu foncé. Le produit est donc très concentré, ce qui induit un petit volume de collecte et donc un temps réduit pour l’évaporation.
3. Troisième purification : Optimisation des conditions de gradient.
Nous avons réalisé la même purification, en optimisant le gradient, avec pour objectif un temps de purification réduit tout en gardant une résolution satisfaisante.
Nous avons réalisé la même purification, en optimisant le gradient, avec pour objectif un temps de purification réduit tout en gardant une résolution satisfaisante.
CONCLUSION :
Comme vous pourrez le constater, l’utilisation de fines particules sphériques améliore grandement la purification :
- Meilleure résolution
- Chargement de l’échantillon plus important
- Réduction de la durée de la purification
- Volumes de collecte moins importants
- Temps d’évaporation réduit
En savoir plus :
- Pour des purifications optimisées, retrouvez et commandez tous nos instruments et nos colonnes dédiés à la purification directement sur notre site.
- Consultez notre article : Flash Purification, Introduction à cette technique de purification
